ИМПРЕГНАЦИЯ (в гистологич. технике), состоит в том, что объекты в кусках или срезах пропитываются раствором металлической соли, которая затем в определенных местах ткани подвергается восстановлению, благодаря чему эти места представляются окрашенными в черный, бурый или другой цвет в зависимости от количества и свойства восстановленного металла. В гистол. технике для целей И. употребляются соли серебра (главн. обр. азотнокислое серебро AgN03), золота (гл. обр. хлористое золото АиС13+2Н20) и осмиевая кислота.
Раствором соли металла можно действовать либо—на свежий, либо на фиксированный объект, либо наконец на приготовленные из него срезы. Восстановление соли является наиболее важной фазой И.; оно может быть произведено или самой тканью без всякого иного воздействия, или способствуют этому процессу, вводя вспомогательные факторы, при которых процессы восстановления совершаются значительно быстрее и энергичнее (например свет, подкисление, нагревание) или наконец прибегают к восстанавливающим средствам (формальдегиду, пирогалловой кислоте и т. д.).
Окраска по Ван Гизону
Иногда по окончании восстановления удаляют не успевшую восстановиться соль металла, промывая препарат раствором гипосульфита. Если при соответствующей обработке должны быть импрегнированы только определенные части тканей, а остальные тканевые элементы должны остаться бесцветными, то это носит название негативного изображения.
Наоборот, иногда получают позитивные изображения, когда все элементы тканей импрегни-руются и лишь нек-рые, совершенно определенные части их остаются неокрашенными. С целью И. азотнокислое серебро было предложено впервые Реклингаузеном и Рисом (Recklinghausen, His); оно дает легко восстанавливаемое соединение с т. н. спайным веществом эпителия и гладких мышц и с основным веществом соединительной ткани, придавая этим частям черный или ■бурый цвет; поэтому импрегнация AgN03 употребляется как реакция для открытия спайного и основного вещества, для чего •служат способы Ранвье, Гойера (Ranvier, Ноуег) и другие.
Кроме этого серебро отлагается в нервных клетках (неврофибрилы), ■осевых цилиндрах и при определенной обработке и фиксации — в элементах глии Инкрустация. Лит.: Enzyklop’adie der mikroskopischen Teclinik, hrsg. v. R. Krause, B. II, p. 888, B. Ill, p. 2090, В.— Wien, 1926—27 (лит.). См. также лит. к ст. Гистологическая техника. А. Саватеев.
Источник: www.med-edu.ru
Окраска гистологических срезов
Импрегнация серебром по Футу (модификация И. С. Виноградова). Приготовленные для обработки срезы помещают в 1% раствор марганцовокислого калия на 5 минут. Промыв срезы в двух порциях воды, их помещают в 5% раствор щавелевой кислоты до побеления.
После этого срезы промывают в 3 — 4 порциях воды и помещают в 2% раствор азотнокислого серебра на 1 — 2 часа (в темноте). Вода во всех промывках применяется только дестиллированная; иглы для работы — стеклянные.
Окраска по Ван Гизону
Вынув срезы, их быстро промывают в 3 порциях воды и помещают в раствор аммиачного серебра, который приготовляется следующим образом. В цилиндр наливают 10 см 3 10% раствора азотнокислого серебра и прибавляют 10 — 12 капель 40% раствора едкого натра.
Выпавший осадок в том же цилиндре промывают дестиллированной водой до тех пор, пока промывная вода не будет оставаться совершенно прозрачной. Далее воду осторожно сливают, а остатки ее удаляют с помощью фильтровальной бумаги. К лишенному воды осадку прибавляют по каплям аммиак до полного его растворения, а затем разводят 20 см 3 дестиллированной воды; полученный раствор фильтруют и сливают в стеклянную чашку с крышкой. В отфильтрованный раствор помещают приготовленные гистологические срезы, закрывают крышкой и ставят на 30 — 40 минут в темное место.
После этого срезы 2 — 3 раза промывают в воде, погружают на 5 минут в 5% раствор формалина, снова промывают водой, помещают на 10 — 15 минут в 1% раствор хлорного золота, опять промывают 1 — 2 раза водой и опускают на 15 — 20 секунд в 5% раствор гипосульфита, после чего длительно промывают в большом сосуде простой водой, докрашивают по ван Гизону и заключают обычным способом в канадский бальзам.
Предметные стекла для изготовления гистотопографических препаратов применяются размером 8,5 Х 8,5 см, для более крупных препаратов — 9 Х 12 см, иногда же 13 X 18 см. В качестве покровных стекол можно использовать пластинки слюды; для изготовления обзорного препарата срез покрывают обыкновенным стеклом.
Большие серийные срезы подвергают детальному изучению сначала под лупой, затем микросуммаром и, наконец, под микроскопом. Наиболее интересующие нас участки исследуются отдельно посредством получения более тонких срезов и производства диференцированной окраски (импрегнация серебром).
Полученные данные сопоставляются с рентгеновскими снимками, сделанными с препарата перед операцией, а иногда и после операции. Под конец устанавливается связь между найденными морфологическими изменениями и клинической картиной болезни.
Такой комплексный метод исследования, введенный нами в повседневную практику, позволил нам, с одной стороны, изучить эволюцию суставных туберкулезных заболеваний, а с другой — установить определенную точку зрения, позволившую объединить две, казалось бы, различные формы проявления туберкулеза — костный и суставной — в один общий, закономерно текущий процесс.
В связи с этим мы подошли с собственной точки зрения и к вопросу о классификации, так различно решавшемуся на протяжении более 100 лет.
«Костно-суставной туберкулез», П.Г.Корнев
Популярные статьи раздела
- Разрушение костей
- Эволюция костно-суставного туберкулеза
- Завершающая фаза развития туберкулезного процесса
- Исчезновение воспалительных явлений в постартритической фазе
- Новая вспышка туберкулезного процесса
- Общее заключение
- Вывод о происхождении и сущности «первичных» оститов
- Интенсивность роста грануломы при переходе процесса на синовиальную оболочку
- Творожистое перерождение тканей
- Различные степени проявления экссудативных, пролиферативных и некротических изменений
Источник: www.medchitalka.ru